UNIVERSIDAD SAN PEDRO FACULTAD DE MEDICINA HUMANA PROGRAMA DE ESTUDIO DE FARMACIA Y BIOQUIMICA Efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas Tesis para optar el Título Profesional de Químico Farmacéutico Autores: Mendoza Ramirez Roxana Ursula Llecllish Angeles Kelen Soledad Asesor Mariños Ginocchio Julio Cesar (Código ORCID: 0000-0003-3323-2943) Nuevo Chimbote - Perú 2023 I INDICE DE CONTENIDOS INDICE DE TABLAS ................................................................................................. ii PALABRA CLAVE ................................................................................................... iii RESUMEN ................................................................................................................. iv ABSTRACT .................................................................................................................. v INTRODUCCIÓN ........................................................................................................ 1 METODOLOGÍA ....................................................................................................... 11 Tipo y Diseño de investigación .................................................................................. 11 Población - Muestra y Muestreo ................................................................................. 12 Técnicas e instrumentos de investigación ................................................................... 12 Procesamiento y análisis de la información ................................................................ 13 RESULTADOS .......................................................................................................... 15 ANÁLISIS Y DISCUSIÓN ........................................................................................ 22 CONCLUSIONES ...................................................................................................... 25 RECOMENDACIONES ............................................................................................. 26 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ....................................................................... 27 ANEXOS .................................................................................................................... 31 I INDICE DE TABLAS Y FIGURAS Porcentaje de rendimiento del extracto etanólico de las hojas Tabla 1 de Passiflora edulis (maracuyá). 18 Marcha fitoquímica de extracto etanólico de las hojas de Tabla 2 Passiflora edulis (maracuyá). 19 Valores de colesterol total CT (mg/dL.) al evaluar el efecto Figura 1 hipolipemiante del extracto etanólicos de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. 20 Valores de lipoproteínas de alta densidad HDL (mg/dL.) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto etanólicos de Figura 2 las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas.. 21 Valores de triglicéridos (mg/dL.) al evaluar el efecto Figura 3 hipolipemiante del extracto etanólicos de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. 22 ii 1 Palabras clave Tema hipolipemiante Especialidad Farmacología Keywords Tema hypilpidemic Especialidad pharmacology Línea de investigación Linea de investigación Recursos naturales y terapéuticos Área Ciencias médicas y de la salud Subárea Medicina basica Disciplina Farmacología y farmacia iii 2 Título Efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. iv 3 Resumen El estudio realizado buscó determinar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas, para tal fin se emplearon 24 ratas albinas divididas en seis grupos, administrándose al primer grupo suero fisiológico 4 mL/Kg, el segundo grupo recibió colesterol 120 mg/kg, tercer grupo recibió atorvastatina 15 mg/Kg, el grupos cuatro recibió extracto 50 mg/Kg, el grupo cinco extracto 100 mg/Kg y el grupo seis 200 mg/kg, al finalizar los parámetros de bioquímica sanguínea evaluados fueron colesterol, triglicéridos y HDL. Se encontró que el grupo que recibió extracto de maracuyá a una concentración de 200 mg/Kg presentó mayor efecto hipolipemiante, cuya eficacia es similar al del estándar farmacológico atorvastatina 15 mg/kg. Concluyendo que el extracto etanólico de maracuyá tiene actividad hipolipemiante en ratas hipercolesterolémicas. Palabras clave: hipolipemiante, extracto etanólico, Passiflora edulis, maracuyá, hipercolesterolemia. v 4 Abstract The study carried out sought to determine the lipid-lowering effect of the ethanolic extract from the leaves of Passiflora edulis (maracuyá) in hypercholesterolemic rats, for this purpose 24 albino rats divided into six groups were used, administering 4 mL/Kg of physiological saline to the first group, the second group received cholesterol 120 mg/kg, third group received atorvastatin 15 mg/kg, group four received 50 mg/kg extract, group five 100 mg/kg extract and group six 200 mg/kg, at the end of the biochemical parameters evaluated were cholesterol, triglycerides and HDL. It was found that the group that received passion fruit extract at a concentration of 200 mg/kg had a greater lipid-lowering effect, whose efficacy is similar to that of the pharmacological standard atorvastatin 15 mg/kg. Concluding that the ethanolic extract of passion fruit has lipid-lowering activity in hypercholesterolemic rats. Keywords: lipid-lowering agent, ethanolic extract, Passiflora edulis, passion fruit, hypercholesterolemia. vi 5 Introducción Antecedentes y fundamentación científica. Aguillón (2020). Evaluaron la actividad hipolipemiante del extracto tanto de las hojas y del zumo del fruto de maracuyá sobre la viabilidad de células hepáticas. se avaluó la viabilidad celular y la inhibición de la enzima α-glucosidasa. El estudio fitoquímico mostró la presencia de flavonoides y compuestos fenólicos en las hojas y componentes fenólicos y ácido ascórbico en ambos extractos. ambos extractos presentaron una disminución de lípidos, el extracto del zumo disminuyó en un 77% la saturación de triglicéridos durante las primeras 24 horas. ambos extractos inhibieron la α-glucosidasa y el extracto presentó actividad antioxidante en un del 93%. Concluyendo que ambos extractos de maracuyá presentan compuestos bioactivos de vital importancia para la salud además que el extracto del jugo de maracuyá presentó mayor actividad hipolipemiante. Angulo y Arce (2018). Evaluaron como el extracto etanólico de las hojas de maracuyá afecta la acción de la enzima catalasa en Mus musculus hiperlipidémicos. Se llegaron a utilizar 30 ratones machos distribuidos de manera aleatoria en cinco grupos. El G1 recibió suero fisiológico 5 ml/Kg, el G2 recibió 10 mL/kg de carboximetilcelulosa (CMC), el G3 recibió 50 mg/kg del extracto, el cuarto grupo recibió 300 mg/kg del extracto y el quinto grupo recibió el estándar farmacológico atorvastatina 10 mg/kg. A las 24 horas se determinaron las concentraciones de colesterol, triglicéridos., hemoglobina y actividad de catalasa. Se concluyó que el extracto a concentraciones de 300 mg/Kg incrementó la actividad de la enzima catalasa, por tanto, presentó una buena actividad antioxidante Ramirez & Vialta (2020). Evaluaron la actividad de la ingesta de un néctar de maracuyá con linaza sobre el peso y grasa corporal en adultos con exceso de peso. Los resultados mostraron que antes del estudio el peso corporal fue de 82.35+14,49 y después fue de 80.08+14,80, la grasa corporal antes fue 35,56+6,04 y después de 7 33.90+6,26, Se concluyó que la ingesta de néctar de maracuyá con linaza disminuye el peso y grasa corporal significativamente. Huamán et al., (2019). Evaluaron la actividad hipolipemiante del extracto acuoso de Gentianella thyrsoidea en ratas hiperlipidémicas. Se emplearon 24 ratas machos divididas en dos grupos experimentales que recibieron el extracto a dosis de 250mg/kg y 500mg/Kg y un control que recibió suero fisiológico. El estado de hiperlipidemia se logró administrando 2.5ml/día de sebo fundido por vía oral durante 15 días. Los parámetros evaluados consistieron en los valores de colesterol, triglicéridos y LDL en sangre antes y después de la administración de los tratamientos. Se encontró una disminución del colesterol del 20.7% y 19.4% en los grupos tratamientos y un aumento del colesterol de 0.91% en el grupo control; los triglicéridos lograron disminuir a 49.63% y 41.55% en los tratamientos, y 18.76% en el control, finalmente el LDL disminuyó 34.64% y 28.24% en los tratamientos y aumento en un 7.58% en el control. Se concluye que el extracto acuoso de Gentianella thyrosidea disminuyó el colesterol total, triglicéridos y LDL, por tanto, se constituye en una alternativa terapéutica para el tratamiento de las dislipidemias. Alvarado (2019). Evaluó la acción hipolipemiante del extracto acuoso de camu camu en ratas albinas. Se utilizaron 36 ratas divididas en seis grupos, donde la actividad hiperlipemiante se logró administrando colesterol puro vía oral durante 10 semanas: los grupos estuvieron conformados por un grupo control positivo, un grupo patrón y tres tratamientos que recibieron el extracto a concentraciones de 50 mg/kg, 250mg/kg y 500mg/kg, respectivamente y el grupo normal que no recibió colesterol. En la semana 10 se midieron el CT, HDL, LDL, VLDL y TG. Se encontró una disminución del colesterol total de 21.56 (grupo 250 mg/Kg). Se concluye que el extracto de Camu camu disminuye el colesterol total e incrementa la acción antioxidante. Huerta et al., (2020). Evaluaron la actividad hipolipemiante del extracto acuoso de berenjena en pacientes en ayuno. La muestra estuvo formada por 14 sujetos cuyas 8 edades oscilaban entre 20-30 años, Se tomaron valores de sangre antes y después de la intervención. A los pacientes se les hizo consumir 500 ml del extracto en ayunas durante un mes. Se encontraron que las concentraciones de colesterol, triglicéridos y glucosa, perímetro abdominal y índice de masa corporal disminuyeron. Se concluye que el extracto de berenjena tiene actividad hipoglicemiante e hipolipemiante marcado, por el contrario, lo efectos evidenciados sestarían asociados a otros factores. Marco teórico hipercolesterolemia La hiperlipidemia se constituye como una de las primeras causas de mortalidad en el mundo, esta enfermedad conlleva al desarrollo de problemas cardiovasculares. (Virani, et al., 2021). Se caracteriza por elevados niveles de colesterol en sangre relacionado por dietas ricas en lípidos, poca actividad física, hábitos alimenticios inapropiados, consumo de alcohol, tabaco, conllevando a problemas de hipertensión arterial, obesidad, diabetes entre otras enfermedades (Bryce et al., 2017, Pérez-Rodrigo, et al., 2021). En el Perú, aproximadamente el 21,1% de la población adulta mayor, presenta enfermedades relacionadas con la hipercolesterolemia, la que se encuentra asociada al metabolismo de los lípidos, cambios hormonales y problemas de absorción y eliminación (Instituto Nacional de Estadística e Informática, 2014; Merchán, et al., 2016), cambio de los hábitos alimentarios (Ascaso 2010, Pajuelo-Ramírez, 2010). Passiflora edulis (maracuyá). La maracuyá es una especie que crece en la Amazonia de Brasil, Australia, África, India, Asia, Venezuela, Colombia Ecuador y Perú. La maracuyá es una especie vegetal 9 tipo enredadera trepadora, con flores hermafroditas, contiene abundante cantidad de antioxidantes, sales minerales, vitaminas y fibra, lo que le data de actividad hipolipemiante, sus frutos contiene elevadas cantidad de vitamina C el mismo que protege a nuestro sistema inmunitario evitando la formación de radicales libres, evitando el envejecimiento celular, además las elevadas cantidades de vitamina A y sus betacarotenos, ayudan a proteger la visión y la piel. Las sales minerales como hierro, potasio, cobre fósforo y magnesio son de gran importancia en una alimentación y dieta saludable (Malavolta, 2004; Mejía, 2014). Justificación de la investigación La investigación se justifica de manera teórica ya que su aporte científico, contribuirá al conocimiento en cuanto a ofrecer información relevante del uso de las hojas y fruto de maracuyá como alternativa terapéutica sobre múltiples enfermedades, sobre todo para la hipercolesterolemia. También se justifica de manera metodológica, ya que pondrá a disposición un instrumento que permita recolectar de manera adecuada y oportuna los datos hallados al determinar actividades hipolipemiantes de diversos extractos y sustancias con actividad terapéutica. Se justifica de manera social ya que permitirá ofrecer una alternativa medicinal al alcance de la población, ya que los productos medicinales y las terapias son muy costosas, también permitirá promover la comercialización de este producto incentivando el comercio de este producto. 10 Problema ¿Cuál será el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas? 11 Conceptuación y operacionalización de las variables Definición conceptual de la Dimensiones Tipo de escala de Indicadores variable (factores) medición Hipolipemiante: Son un Perfil lipídico Colesterol, triglicéridos, mg/dL grupo farmacológico que HDL, LDL, VHDL. poseen diversos mecanismos de acción, una de ellas consiste en modificar las concentraciones de las fracciones lipídicas, favoreciendo el perfil lipídico y disminuyendo las probables enfermedades cardiovasculares. (Llanes, 2017). Passiflora edulis Estudio Metabolitos Ausencia, (maracuyá): De la familia fitoquímico secundarios. poca, regular y de las Pasifloráceas, planta abundante trepadora originaria de cantidad. Centroamérica. con frutos comestibles, posee abundante vitamina A y C, potasio, fósforo y magnesio, utilizado en la culinaria, cosmética y su fruto y hojas se usan para regular la presión arterial, problemas cardiacos, así como regular el colesterol en sangre ( Rojas, 2009). 12 Hipótesis Hipótesis alternativa: Ha= El extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) tiene efecto hipolipemiante en ratas hipercolesterolémicas. Hipótesis nula: Ho= El extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) no tiene efecto hipolipemiante en ratas hipercolesterolémicas. Objetivos Objetivo general:  Determinar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. Objetivos específicos: 1. Obtener el extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá). 2. Realizar el estudio fitoquímico del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá). 3. Evaluar el efecto hipolipemiante de del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. 13 6 Metodología a) Tipo y diseño de investigación Tipo de investigación: El trabajo de investigación es de naturaleza básica y permitirá aportar con nueva información relacionados a las variables de estudio, esto permitirá que futuras investigaciones cuenten con información confiable (Duran-Gómez, Rodríguez- Benito, 2020). Diseño de la investigación: El trabajo experimental permite manipular las variables de manera intencional (independiente), para analizar la variable dependiente Hernández et al., (2006). Por lo tanto, la presente investigación pretende demostrar la actividad hipolipemiante del extracto de maracuyá en ratas hipercolesterolémicas, en donde se tuvo en cuenta el siguiente diseño experimental: Grupos farmacológico tratamiento G1 SSF. 4ml/Kg G 2 Colesterol. 120mg/Kg (C) G3 (C) + Atorvastatina. 15mg/Kg G 4 (C) + Extracto de maracuyá 50mg/Kg G 5 (C) + Extracto de maracuyá 100mg/Kg G 6 (C) + Extracto de maracuyá 200mg/Kg 14 b) Población, muestra y muestreo Población La población está concebida como un conjunto de juicios, maquinas, personas, cosas, etc que tiene acaracterísticas comunes que son de interés del investigador (Arias et al., 2016). La población, estuvo constituida Rattus rattus y extracto de maracuyá. Criterios de inclusión - Se incluyeron Rattus rattus variedad albina cepa Holtzman sanas. - Se incluirán hojas frescas de Passiflora edulis. Criterios de exclusión - Se excluirán ratas de otras cepas, ratas viejas y enfermas. - Se excluirán hojas de Passiflora edulis en mal estado de conservación. Muestra La muestra está representada por un grupo de unidades de una población, los mismos que cumplen ciertos criterios de inclusión y exclusión, deben estar en una cantidad representativa y es factible de precisar sus características durante la elaboración del plan de investigación (Hernández, et al., 2014). La muestra estará conformada por 500 gramos de hojas de Passiflora edulis. Técnica de muestreo El muestreo que se va a utilizar es de tipo probabilístico ya que al utilizar una población de ratas cuyas características son similares el sexo, edad, peso y cepa utilizada, por tanto cualquiera de ellos pueden ser seleccionados (Kinnear y Taylor, 1998). 15 c) Técnicas e instrumentos de investigación Obtención de la muestra vegetal: Las hojas Passiflora edulis fueron adquiridas en el mercado “De la chacra a la olla”, el mismo que se encuentra localiado en el centro de la ciudad de Chimbote, la cantidad requerida fue de 500 g. Obtención del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) (CYTED, 1995). Para obtener el extracto de las hojas de maracuyá, las hojas se seleccionaron, se lavaron y colocaron a desecación a 40°C en una estufa, cuando el material estuvo seco y con sonido crocante al tacto, se pulverizó en un molino manual, el polvo fino obtenido se maceró con etanol de 96° a 25° por una semana, finalmente el macerado se filtró haciendo uso de un papel filtro y el líquido obtenido se colocó en una estufa a 40ºC para eliminar el alcohol y mantenerlo hasta peso constante. El residuo obtenido se recolecta haciendo uso de un cuharilla de acero y se guardó en un frasco de vidrio. Estudio fitoquímico del Extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) (Lock, 2017). El estudio fitoquímico consisitió en una dilución del extracto, el mismo que sirvió para armar una batería en tubos de ensayo conteniendo 1 mL de dilución, posteriormente se agregaron reactivos de identificación cualitativa para determinar la presencia de los metabolitos secundarios como saponinas, alcaloides, , aminoácidos libres, flavonoides y compuestos fenólicos. Evaluación del efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) (Hirunpanich et al, 2006). Se emplearon seis grupos de cuatro ratas Holtzman, se les administró al primer grupo suero fisiológico 4 mL/Kg, el segundo colesterol 120 mg/kg, el tercer grupo 16 recibió atorvastatina en concentraciones de 15 mg/Kg, y los grupo cuatro, cinco y seis recibieron el extracto de maracuyá en concentraciones de 50mg/kg, 100mg/kg y 200mg/kg respectivamente, el colesterol se administró vía oral diluido en aceite de oliva durante un mes, al finalizar la actividad se tomó una muestra sanguínea por punción cardiaca y se evaluó los parámetros como el colesterol y triglicéridos. d) Procesamiento y análisis de la información Valderrama (2015), considera que posterior a la recopilación de la información, se debe de proceder a aplicar mecanismos estadísticos para dar solución a nuestro problema, de tal manera permita aceptar o rechazar nuestras teorías planteadas. Los volúmenes promedios de orina obtenidos después de cinco horas fueron recolectados en una tabla de recolección de datos elaborados por el autor, y se utilizaron para aplicar la estadística descriptiva donde utilizando tablas se expresó mediante el valor medio, error estándar, mediana, etc, Se utilizó el programa estadístico Excel, considerándose una confiabilidad del 95%. 17 7 Resultados Tabla 1 Porcentaje de rendimiento del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá). Muestra utilizada para obtención del Fórmula zumo Hojas de Passiflora edulis (maracuyá) %R = Cantidad obtenida x 100 Cantidad: 100 g de hojas Cantidad de muestra %R = (4.1 g/100g) x 100 = 4.1% Se obtiene un rendimiento del 4.1% Dónde: %R = porcentaje de rendimiento En la tabla 1 se muestra el porcentaje de rendimiento del extracto etanólico de Passiflora edulis (maracuya) por cada 100 gramos de muestra, siendo el valor obtenido de 4.1% 18 Tabla 2 Marcha fitoquímica de extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá). Reacción de Identificación Metabolito Secundario cantidad Espuma Saponinas negativo Cloruro de hierro (III) Compuestos fenólicos. abundante Shinoda. Flavonoides. regular Dragendorff Alcaloides negativo Lieberman Terpenoides regular En la tabla 2. Se observa los resultados del estudio fitoquímico extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá), encontrándose que los compuestos fenólicos son los metabolitos en abundante cantidad, y los flavonoides y terpenoides se encuentran en regular, mientras que no se halló saponinas y alcaloides. 19 Colesterol total (mg/dL). 233.6 201 173 176.4 160.8 151 1 SSF 4 mL/kg Colesterol 120 mg/Kg (C) (C) + atorvastatina 15 mg/Kg (C) + passiflora 50 mg/Kg (C) + passiflora 100 mg/Kg (C) + passiflora 200 mg/Kg Figura 1. Valores de colesterol total CT (mg/dL.) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto de maracuyá. En la figura 1, se puede observar el promedio de los valores de colesterol total en las muestras sanguíneas en ratas, encontrándose un valor de 173.00 mg/dL en el grupo control que recibió SSF 4 mL/Kg, 233.6 mg/dL en el grupo que recibió el inductor colesterol, 151 mg/dL para el grupo que recibió el estándar farmacológico Silimarina 15 mg/Kg y de 201; 176.4 y 160.8 mg/dL para los grupos que recibieron el extracto de maracuyá respectivamente. 20 Lipoproteínas de elavada densidad HDL (mg/dL). 70 58.8 60 50 45.2 46.4 40.8 41.8 40 31.8 30 20 10 0 1 SSF 4 mL/kg Colesterol 120 mg/Kg (C) (C) + atorvastatina 15 mg/Kg (C) + passiflora 50 mg/Kg (C) + passiflora 100 mg/Kg (C) + passiflora 200 mg/Kg Figura 2. Valores de lipoproteínas de alta densidad HDL (mg/dL.) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto de maracuyá. En la figura 2, se puede observar el promedio de los valores HDL en las muestras sanguíneas en ratas, encontrándose un valor de 45.2 mg/dL en el grupo control que recibió SSF 4 mL/Kg, 31.8 mg/dL en el grupo que recibió el inductor colesterol, 58.8mg/dL para el grupo que recibió el estándar farmacológico Silimarina 15 mg/Kg y de 40.8; 41.8 y 46.4 mg/dL de extracto de maracuyá respectivamente. 21 Triglicéridos (mg/dL). 168.2 145.6 144 140.4 137 122.2 1 SSF 4 mL/kg Colesterol 120 mg/Kg (C) (C) + atorvastatina 15 mg/Kg (C) + passiflora 50 mg/Kg (C) + passiflora 100 mg/Kg (C) + passiflora 200 mg/Kg Figura 3. Valores de triglicéridos (mg/dL.) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto de maracuyá. En la figura 3, se puede observar el promedio de los valores Triglicéridos en las muestras sanguíneas en ratas, encontrándose un valor de 145.6 mg/dL en el grupo control que recibió SSF 4 mL/Kg, 168.2 mg/dL en el grupo que recibió el inductor colesterol, 122.2 mg/dL para el grupo que recibió el estándar farmacológico Silimarina 15 mg/Kg y de 144; 140.4 y 137 mg/dL de extracto de maracuyá respectivamente. 22 8 Análisis y discusión Se llegó a obtener un porcentaje de rendimiento del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá), encontrándose que de cada 100 gramos de hojas pulverizadas y maceradas se obtiene 4.1 gramos de extracto, por tanto, su rendimiento fue del 4.1 %. (Tabla 1). El estudio de los compuestos bioactivos del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá), evidenciándose que los compuestos fenólicos se encuentran en abundante cantidad, los terpenoides y flavonoides en regular cantidad, así mismo no se llegaron a identificar la presencia de alcaloides y saponinas (Tabla 2), cuyos resultados se asemejan con los reportados por Carbajal el al., (2014). Para determinar el efecto hipolipemiante del extracto de maracuyá se siguió el método de Hirunpanich et al, del 2006, cuyo estado hiperlipemiante se logra administrando 120 mg/kg de colesterol (v.o) un mes acompañados con los tratamientos, al finalizar la actividad se anestesió a los especímenes y se tomó una muestra de sangre. Los valores promedio de colesterol total en las muestras sanguíneas en ratas, fueron de 173.00 mg/dL para el control SSF 4 mL/Kg, 233.6mg/dL para el grupo inductor colesterol, 151mg/dL para el grupo estándar farmacológico Atorvastatina 15 mg/Kg y para el extracto de maracuyá fueron de 201.00 mg/dL (Extracto 50 mg/Kg); 176.4 mg/dL (Extracto 100mg/Kg) y 160.8 mg/dL (Extracto 200mg/Kg). (Figura 1), cuyas concentraciones están dentro de los valores normales de 25 – 200 mg/dL, ya que valores superiores podría ser causante de problemas cardiacos e infartos. 23 El valor promedio de lipoproteína de elevada densidad en las muestras sanguíneas en ratas, fueron de 45.20 mg/dL para el control SSF 4 mL/Kg, 31.8mg/dL para el grupo que recibió el inductor colesterol, 58.8mg/dL para el grupo estándar farmacológico Atorvastatina 15 mg/Kg y para el extracto de maracuyá fueron de 40.8 mg/dL (Extracto 50 mg/Kg); 41.8 mg/dL (Extracto 100mg/Kg) y 46.4mg/dL (Extracto200 mg/Kg). (Figura 2), éstos valores encontrados en los tratamientos se encuentran en concentraciones superiores que es de 50 mg/dL, siendo favorable ya que valores menores a 35 mg/dL provocaría riesgo cardiovascular. Los valores Triglicéridos en las muestras sanguíneas en ratas, fueron de 145.60 mg/dL para el control SSF 4mL/Kg, 168.2mg/dL para el grupo colesterol, 122.2mg/dL para el grupo el estándar farmacológico Atorvastatina 15 mg/Kg y para el extracto de maracuyá fueron de 144 mg/dL (Extracto 50 mg/Kg); 140.4 mg/dL (Extracto 100mg/Kg) y 137 mg/dL (Extracto 200mg/Kg). (Figura 3), esto es importante ya que, si el triglicérido incrementaría, éstos también aumentarían de enfermedades cardiacas y cerebrovasculares. Todos los resultados encontrados se ven apoyados por los trabajos de Aguillón (2020). Quien evidencio efecto hipolipemiante del zumo del fruto y hojas de maracuyá asociados a la presencia de flavonoides y compuestos fenólicos. Así mismo Ramirez & Vialta (2020). Demostró el efecto de la ingesta del néctar de Maracuyá con Linaza evidenciaron una disminución del peso y grasa corporal. 24 9 Conclusiones y recomendaciones Conclusiones 1. Se obtuvo un 4.1% de porcentaje de rendimiento del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá). 2. El estudio fitoquímico del extracto de maracuyá mostró la presencia de compuestos fenólicos en abundante cantidad, y los terpenoides y flavonoides en regular cantidad. 3. Se concluye que el extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) tiene actividad hipolipemiante en ratas hipercolesterolémica, siendo el de mejor efecto a concentraciones de 200 mg/Kg. 25 Recomendaciones 1. Realizar investigaciones donde se determine el efecto hipolipemiante del producto medicinal administrado por diferentes vías de administración. 2. Realizar estudios de seguridad aguda y crónica en ratas, ratones y artemia franciscana. 3. Realizar estudios para evaluar la actividad hipolipemiante utilizado el fruto de maracuyá o la mezcla entre el fruto y hojas. 26 10 Referencias bibliográficas Aguillón Osma, J. (2020). Efecto hipolipemiante de los extractos de hojas y del jugo de Passiflora edulis en un modelo celular hepático (Doctoral dissertation, Facultad de Ciencias de la Salud). Arias-Gómez, J., Villasís-Keever, M. Á., & Novales, MGM (2016). El protocolo de investigación III: la población de estudio. Revista Alergia México , 63 (2), 201- 206. Alvarado Puray, C. Y. (2019). Actividad antioxidante in vivo del extracto acuoso del fruto de Myrciaria dubia “camu camu” y efecto hipolipemiante en ratas Holtzman. Angulo Díaz, D. C., & Arce Luera, A. A. (2018). Efecto del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) sobre la actividad de catalasa en Mus musculus var. swiss. con hiperlipidemia inducida. Arias-Gómez, J., Villasís-Keever, M. Á., & Novales, MGM (2016). 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Gracias. 31 12 Anexos Anexo 1 Ficha de recolección de datos (instrumento) HDL TRI Nro Tratamiento CT mg/dL mg/dL mg/dL 1 SSF 4 mL/kg 175 40 145 2 SSF 4 mL/kg 185 54 138 3 SSF 4 mL/kg 180 48 149 4 SSF 4 mL/kg 160 41 147 5 SSF 4 mL/kg 165 43 149 6 Colesterol 120 mg/kg ( C ) 241 33 156 7 Colesterol 120 mg/kg ( C ) 232 34 173 8 Colesterol 120 mg/kg ( C ) 226 30 169 9 Colesterol 120 mg/kg ( C ) 225 32 165 10 Colesterol 120 mg/kg ( C ) 244 30 178 11 C + Atorvastatina 15mg/kg 150 55 125 12 C + Atorvastatina 15mg/kg 145 56 122 13 C + Atorvastatina 15mg/kg 160 50 120 14 C + Atorvastatina 15mg/kg 133 67 125 15 C + Atorvastatina 15mg/kg 167 66 119 16 C + passiflora 50 mg/kg 205 44 148 17 C + passiflora 50 mg/kg 190 42 145 18 C + passiflora 50 mg/kg 200 40 140 19 C + passiflora 50 mg/kg 203 39 147 20 C + passiflora 50 mg/kg 207 44 140 21 C + passiflora 100 mg/kg 215 45 138 22 C + passiflora 100 mg/kg 200 50 141 23 C + passiflora 100 mg/kg 190 42 139 24 C + passiflora 100 mg/kg 195 43 140 25 C + passiflora 100 mg/kg 198 38 144 26 C + passiflora 200 mg/kg 162 52 135 27 C + passiflora 200 mg/kg 160 50 138 28 C + passiflora 200 mg/kg 163 56 140 29 C + passiflora 200 mg/kg 158 54 135 30 C + Passiflora 200 mg/kg 161 50 137 32 Anexo 2 Matriz de consistencia Problema Variables Objetivos Hipótesis Metodología Objetivo general Determinar el Hipótesis alternativa: efecto Ha= El ¿Cuál hipolipemiante del extracto será el extracto etanólico etanólico de Tipo de las hojas de efecto Hipolipemia de las hojas de Investigación: Passiflora hipolipem nte Básica Passiflora edulis en edulis (maracuyá) Diseño de iante del ratas tiene efecto Investigación: extracto hipercolesterolémic hipolipemiante Experimental en ratas etanólico as. hipercolesterol Población: Rattus de las émicas. rattus hojas de Muestra: 20 ratas albinas, 250 g de Passiflora Objetivos Hipótesis hojas de maracuyá. específicos nula: edulis Técnica e Ho= El (maracuy Obtener el extracto Instrumento extracto á) en ratas etanólico de las etanólico de de recolección de las hojas de datos: Se utilizó la hipercoles hojas de Passiflora Passiflora técnica de la terolémic Passiflora edulis (maracuyá). edulis observación y como (maracuyá) no instrumento una as? edulis Realizar el estudio tiene efecto tabla de recolección (maracuyá) hipolipemiante de datos. fitoquímico del en ratas extracto etanólico hipercolesterol émicas. de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas 33 hipercolesterolémic as. Evaluar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémic as. Anexo 3 34 Anexo 3.1. Estadística descriptiva de los datos obtenidos de colesterol total CT (mg/dL) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. (C) + (C) + SSF 4 Colesterol (C) + (C) + passiflora passiflora Parámetro mL/kg 120 atorvastatina passiflora 100 200 mg/Kg (C) 15 mg/Kg 50 mg/Kg mg/Kg mg/Kg Media 173,00 233,60 151,00 201,00 176,40 160,80 Error típico 4,64 3,85 5,91 2,98 2,11 0,86 Mediana 175,00 232,00 150,00 203,00 176,00 161,00 Moda #N/A #N/A #N/A #N/A #N/A #N/A Desviación estándar 10,37 8,62 13,21 6,67 4,72 1,92 Varianza de la muestra 107,50 74,30 174,50 44,50 22,30 3,70 Curtosis -1,96 -2,68 -0,68 2,23 1,01 -0,02 Coeficiente de asimetría -0,24 0,29 -0,22 -1,47 0,11 -0,59 Rango 25,00 19,00 34,00 17,00 13,00 5,00 Mínimo 160,00 225,00 133,00 190,00 170,00 158,00 Máximo 185,00 244,00 167,00 207,00 183,00 163,00 Suma 865,00 1168,00 755,00 1005,00 882,00 804,00 Cuenta 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 Mayor (1) 185,00 244,00 167,00 207,00 183,00 163,00 Nivel de confianza(95,0%) 12,87 10,70 16,40 8,28 5,86 2,39 Anexo 3.2. Análisis de varianza de los datos obtenidos de colesterol total CT (mg/dL) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. 35 Análisis de varianza de un factor RESUMEN Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza SSF 4 mL/kg 5 865 173 107,5 Colesterol 120 mg/Kg (C) 5 1168 233,6 74,3 (C) + atorvstatina 15 mg/Kg 5 755 151 174,5 (C) + passiflora 50 mg/Kg 5 1005 201 44,5 (C) + passiflora 100 mg/Kg 5 882 176,4 22,3 (C) + passiflora 200 mg/Kg 5 804 160,8 3,7 ANÁLISIS DE VARIANZA Valor Origen de las Suma de Grados de Promedio de los crítico para variaciones cuadrados libertad cuadrados F Probabilidad F Entre grupos 22719,7667 5 4543,95333 63,8793814 4,4569E-13 2,62065415 Dentro de los grupos 1707,2 24 71,1333333 Total 24426,9667 29 Anexo 3.3. Estadística descriptiva de los datos obtenidos de HDL (mg/dL) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. 36 (C) + (C) + SSF 4 Colesterol (C) + (C) + passiflora passiflora Parámetro mL/kg 120 atorvastatina passiflora 100 200 mg/Kg (C) 15 mg/Kg 50 mg/Kg mg/Kg mg/Kg Media 45,20 31,80 58,80 40,80 41,80 46,40 Error típico 2,60 0,80 3,31 1,07 1,07 1,36 Mediana 43,00 32,00 56,00 41,00 42,00 47,00 Moda #N/A 30,00 #N/A #N/A #N/A #N/A Desviación estándar 5,81 1,79 7,40 2,39 2,39 3,05 Varianza de la muestra 33,70 3,20 54,70 5,70 5,70 9,30 Curtosis -0,16 -2,32 -2,37 -1,12 -1,12 0,00 Coeficiente de asimetría 1,02 0,05 0,17 0,21 0,21 -0,54 Rango 14,00 4,00 17,00 6,00 6,00 8,00 Mínimo 40,00 30,00 50,00 38,00 39,00 42,00 Máximo 54,00 34,00 67,00 44,00 45,00 50,00 Suma 226,00 159,00 294,00 204,00 209,00 232,00 Cuenta 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 Mayor (1) 54,00 34,00 67,00 44,00 45,00 50,00 Nivel de confianza(95,0%) 7,21 2,22 9,18 2,96 2,96 3,79 Anexo 3.4. Análisis de varianza de los datos obtenidos de HDL (mg/dL) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. 37 Análisis de varianza de un factor RESUMEN Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza SSF 4 mL/kg 5 226 45,2 33,7 Colesterol 120 mg/Kg (C) 5 159 31,8 3,2 (C) + atorvstatina 15 mg/Kg 5 294 58,8 54,7 (C) + passiflora 50 mg/Kg 5 204 40,8 5,7 (C) + passiflora 100 mg/Kg 5 209 41,8 5,7 (C) + passiflora 200 mg/Kg 5 232 46,4 9,3 ANÁLISIS DE VARIANZA Valor Origen de las Suma de Grados de Promedio de los crítico para variaciones cuadrados libertad cuadrados F Probabilidad F Entre grupos 1950,26667 5 390,053333 20,8398931 5,0565E-08 2,62065415 Dentro de los grupos 449,2 24 18,7166667 Total 2399,46667 29 Anexo 3.5. Estadística descriptiva de los datos obtenidos de triglicéridos (mg/dL) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. 38 (C) + (C) + SSF 4 Colesterol (C) + (C) + passiflora passiflora Parámetro mL/kg 120 atorvastatina passiflora 100 200 mg/Kg (C) 15 mg/Kg 50 mg/Kg mg/Kg mg/Kg Media 145,60 168,20 122,20 144,00 140,40 137,00 Error típico 2,04 3,73 1,24 1,70 1,03 0,95 Mediana 147,00 169,00 122,00 145,00 140,00 137,00 Moda 149,00 #N/A 125,00 140,00 #N/A 135,00 Desviación estándar 4,56 8,35 2,77 3,81 2,30 2,12 Varianza de la muestra 20,80 69,70 7,70 14,50 5,30 4,50 Curtosis 2,42 0,24 -2,70 -2,95 1,13 -0,96 Coeficiente de asimetría -1,57 -0,57 0,01 -0,27 1,03 0,52 Rango 11,00 22,00 6,00 8,00 6,00 5,00 Mínimo 138,00 156,00 119,00 140,00 138,00 135,00 Máximo 149,00 178,00 125,00 148,00 144,00 140,00 Suma 728,00 841,00 611,00 720,00 702,00 685,00 Cuenta 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00 Mayor (1) 149,00 178,00 125,00 148,00 144,00 140,00 Nivel de confianza(95,0%) 5,66 10,37 3,45 4,73 2,86 2,63 Anexo 3.6. Análisis de varianza de los datos obtenidos de triglicéridos (mg/dL) al evaluar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá) en ratas hipercolesterolémicas. 39 Análisis de varianza de un factor RESUMEN Grupos Cuenta Suma Promedio Varianza SSF 4 mL/kg 5 728 145,6 20,8 Colesterol 120 mg/Kg (C) 5 841 168,2 69,7 (C) + atorvstatina 15 mg/Kg 5 611 122,2 7,7 (C) + passiflora 50 mg/Kg 5 720 144 14,5 (C) + passiflora 100 mg/Kg 5 702 140,4 5,3 (C) + passiflora 200 mg/Kg 5 685 137 4,5 ANÁLISIS DE VARIANZA Valor Origen de las Suma de Grados de Promedio de los crítico para variaciones cuadrados libertad cuadrados F Probabilidad F Entre grupos 5590,7 5 1118,14 54,7660408 2,4213E-12 2,62065415 Dentro de los grupos 490 24 20,4166667 Total 6080,7 29 40